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EPO-CHO-T中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。?/span>
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EPO-CHO-T 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克?。┙榻B
EPO-CHO-T 細胞是通過基因工程技術構建的中國倉鼠卵巢(CHO)細胞亞系克隆,其核心特點是能夠高效穩(wěn)定表達人促紅細胞生成素(Erythropoietin,EPO)。EPO 是一種由腎臟分泌的糖蛋白激素,可刺激骨髓中紅細胞前體的增殖和分化,在貧血治療等領域具有重要臨床價值。
從生物學特性來看,EPO-CHO-T 細胞保留了 CHO 細胞貼壁生長的特性,細胞呈多邊形或不規(guī)則形,貼壁后相互連接緊密,在顯微鏡下可見典型的上皮樣細胞形態(tài)。經過基因改造與篩選,該細胞系具有穩(wěn)定的 EPO 表達能力,所表達的 EPO 蛋白經過復雜的糖基化修飾,與天然人源 EPO 的結構和功能高度相似,能夠特異性結合紅細胞生成素受體(EPOR),激活下游 JAK2-STAT5 等信號通路,促進紅細胞生成。此外,EPO-CHO-T 細胞在多次傳代后仍能維持穩(wěn)定的 EPO 表達水平,遺傳穩(wěn)定性良好,適合長期研究與工業(yè)化生產。
在培養(yǎng)條件方面,EPO-CHO-T 細胞常用含 10% - 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基進行培養(yǎng),為細胞生長和蛋白表達提供充足營養(yǎng),同時添加 1% 雙抗(青霉素和鏈霉素)防止微生物污染。培養(yǎng)環(huán)境需維持在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中,保持培養(yǎng)基 pH 值穩(wěn)定。當細胞融合度達到 80% - 90% 時,使用 0.25% 胰酶 - EDTA 消化液進行傳代,輕柔吹打使細胞分散后,按 1:3 - 1:5 的比例接種到新的培養(yǎng)器皿中。凍存時,凍存液由 90% 胎牛血清和 10% DMSO 組成,將細胞密度調整至合適濃度后,經程序降溫保存于液氮中。
在生物醫(yī)藥領域,EPO-CHO-T 細胞發(fā)揮著關鍵作用。臨床上廣泛使用的重組人促紅細胞生成素(rhEPO)藥物,如 epoetin alfa(依泊汀 α)、darbepoetin alfa(達貝泊汀 α)等,大多以 EPO-CHO-T 細胞作為生產宿主。這些藥物用于治療慢性腎病貧血、癌癥化療后貧血等疾病,顯著改善患者的生活質量。此外,EPO-CHO-T 細胞還可作為研究紅細胞生成機制、藥物篩選和評估的重要工具,通過調控細胞培養(yǎng)條件或添加藥物,觀察 EPO 表達及相關信號通路的變化,為開發(fā)新型貧血治療藥物和策略提供理論依據(jù)和實驗基礎。
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