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c7b8c3小鼠雜交瘤細胞
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規(guī)格:T25瓶
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C7B8C3 小鼠雜交瘤細胞概述
C7B8C3 小鼠雜交瘤細胞
是通過細胞融合技術獲得的一類永生化細胞,通常用于制備單克隆抗體。以下從
基本特性、培養(yǎng)要點、應用場景
及
注意事項
等方面展開介紹:
一、基本特性
來源與背景
由
小鼠脾細胞(通常來自免疫小鼠)與骨髓瘤細胞融合
而成,融合后細胞兼具 “產(chǎn)生特異性抗體”(脾細胞特性)和 “無限增殖”(骨髓瘤細胞特性)的能力。
C7B8C3 可能是特定實驗室命名的細胞株,具體來源需結合文獻或細胞庫信息(如 ATCC、DSMZ 等)確認。
關鍵功能
穩(wěn)定分泌
單克隆抗體
,可用于研究特定抗原的結構、功能或免疫應答機制。
適用于抗體的大規(guī)模生產(chǎn),為免疫診斷、靶向治療等提供基礎材料。
二、培養(yǎng)與維護要點
培養(yǎng)基與添加劑
基礎培養(yǎng)基
:常用 RPMI 1640 或 DMEM,需添加 **10% 胎牛血清(FBS)** 以提供生長因子。
選擇性試劑
:若融合后需篩選陽性克隆,培養(yǎng)基中需加入 **HAT(次黃嘌呤 - 氨基蝶呤 - 胸腺嘧啶)** 等篩選劑,抑制未融合的骨髓瘤細胞生長。
培養(yǎng)條件
溫度與氣體
:37℃恒溫培養(yǎng)箱,5% CO?環(huán)境(維持培養(yǎng)基 pH)。
傳代與密度
:當細胞密度達 80%~90% 時需傳代,傳代比例通常為 1:3~1:5,避免過度匯合導致凋亡。
凍存與復蘇
凍存液
:含 10% DMSO、20% FBS 的培養(yǎng)基,按每管 1×10?~5×10?細胞分裝,程序降溫后保存于 - 196℃液氮。
復蘇要點
:快速解凍(37℃水?。x心去除凍存液后更換新鮮培養(yǎng)基,避免 DMSO 對細胞的毒性。
三、應用場景
單克隆抗體制備
通過有限稀釋法篩選
單克隆化細胞亞株
,確??贵w的均一性和特異性,用于:
免疫熒光(IF)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等檢測技術。
腫瘤靶向治療(如抗體 - 藥物偶聯(lián)物 ADC)或免疫治療研究。
抗原 - 抗體相互作用研究
利用 C7B8C3 細胞分泌的抗體,分析抗原表位、抗體親和力等,為疫苗設計或抗體工程提供數(shù)據(jù)。
生物制藥與工業(yè)生產(chǎn)
通過懸浮培養(yǎng)或生物反應器擴大培養(yǎng),實現(xiàn)抗體的規(guī)模化生產(chǎn),滿足科研或臨床前研究需求。
四、注意事項
細胞污染監(jiān)測
定期鏡檢觀察細胞形態(tài)(正常雜交瘤細胞呈圓形、懸浮或輕微貼壁,狀態(tài)良好時折光性強),警惕細菌、真菌或支原體污染(如培養(yǎng)基渾濁、細胞生長停滯)。
建議定期使用支原體檢測試劑盒(如 PCR 法)進行篩查。
遺傳穩(wěn)定性
長期傳代可能導致
抗體分泌能力下降或基因變異
,建議凍存早期代數(shù)細胞作為 “種子庫”,避免頻繁傳代。
生物**操作
涉及動物源性細胞時,需遵循生物**二級(BSL-2)實驗室規(guī)范,佩戴防護裝備,避免交叉污染。
五、資源獲取與參考文獻
細胞來源
:可從 ATCC(American Type Culture Collection)、中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC)等官方庫查詢 C7B8C3 細胞株信息。
文獻檢索
:通過 PubMed、Google Scholar 等平臺搜索 “C7B8C3 hybridoma cell”,獲取其具體應用案例(如靶向某抗原的抗體研究)。
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