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4D3小鼠雜交瘤細胞
貨號:BY-1146
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規(guī)格:T25瓶
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4D3 小鼠雜交瘤細胞
4D3 小鼠雜交瘤細胞是通過將小鼠 B 淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合獲得的特殊細胞系,憑借其穩(wěn)定分泌特異性抗體和無限增殖的能力,成為免疫學研究、單克隆抗體制備領(lǐng)域的重要模型。
從細胞特性來看,4D3 細胞呈懸浮生長狀態(tài),在顯微鏡下,細胞多為圓形或橢圓形,直徑約 10 - 15μm,折光性良好。細胞核大而圓,核仁清晰可見,占據(jù)細胞約三分之二的空間,細胞質(zhì)內(nèi)偶見與抗體合成相關(guān)的囊泡結(jié)構(gòu)。利用流式細胞術(shù)檢測,可發(fā)現(xiàn)其穩(wěn)定表達 CD19、CD79a 等 B 淋巴細胞特異性標志物,證實其 B 細胞來源屬性。此外,細胞染色體核型穩(wěn)定,確保了在體外長期傳代過程中,仍能維持穩(wěn)定的增殖和抗體分泌能力。
培養(yǎng) 4D3 細胞時,常用添加 10% - 15% 胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基,同時加入 1% 的雙抗(青霉素和鏈霉素)防止細菌污染。細胞適宜在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中生長,當細胞密度達到
時,需及時進行傳代。傳代采用離心重懸法,按 1:3 - 1:5 的比例將細胞接種至新的培養(yǎng)瓶。凍存時,使用含 10% DMSO、90% 胎牛血清的凍存液,經(jīng)程序降溫后保存于液氮,以維持細胞活性。
在科研應(yīng)用方面,4D3 小鼠雜交瘤細胞主要用于單克隆抗體制備??蒲腥藛T通過免疫小鼠,獲取能識別特定抗原的 B 淋巴細胞,與骨髓瘤細胞融合篩選出 4D3 細胞后,經(jīng)克隆化培養(yǎng),可產(chǎn)生針對單一抗原表位的高特異性單克隆抗體。這些抗體在疾病診斷領(lǐng)域,可用于開發(fā)腫瘤標志物檢測試劑、病原體快速診斷試劑盒;在基礎(chǔ)研究中,有助于探究抗原 - 抗體相互作用機制、解析細胞信號傳導通路;在治療領(lǐng)域,可作為靶向藥物的基礎(chǔ),通過偶聯(lián)細胞毒素或放射性核素,實現(xiàn)對腫瘤細胞的精準治療。
4D3 細胞系的優(yōu)勢明顯,其抗體分泌穩(wěn)定,實驗重復性高,適合大規(guī)模生產(chǎn);體外培養(yǎng)技術(shù)成熟,操作相對簡便,便于實驗室開展研究。但也存在局限性,細胞融合后的篩選過程繁瑣且耗時,部分 4D3 細胞在長期傳代過程中可能出現(xiàn)抗體分泌能力下降或丟失的情況;此外,小鼠來源的單克隆抗體應(yīng)用于人體時,存在免疫原性問題,通常需要進行人源化改造以降低免疫排斥反應(yīng)。
使用 4D3 小鼠雜交瘤細胞時,需定期檢測細胞的抗體分泌活性,及時篩選出穩(wěn)定分泌的細胞株;嚴格遵守無菌操作規(guī)范,防止細胞污染;同時合理控制傳代次數(shù),避免因過度傳代導致細胞老化,從而保證實驗結(jié)果的準確性和可靠性。憑借其獨特的生物學特性,4D3 細胞將持續(xù)推動生命科學研究與生物醫(yī)藥領(lǐng)域的發(fā)展。