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MIN-6小鼠MIN6β細胞
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MIN-6 小鼠 MIN6β 細胞
MIN-6 小鼠 β 細胞是研究胰島 β 細胞功能、糖尿病發(fā)病機制及治療策略的經(jīng)典細胞模型,在糖尿病研究領(lǐng)域具有不可替代的地位。
MIN-6 細胞源自轉(zhuǎn)基因小鼠胰島素瘤,由 Miyazaki 等人通過將大鼠胰島素 Ⅱ 基因的啟動子與猿猴病毒 40(SV40)的 T 抗原基因融合,導(dǎo)入小鼠胰島 β 細胞并篩選獲得。在生物學(xué)特性上,MIN-6 細胞呈貼壁生長,形態(tài)多為多邊形或不規(guī)則形,與正常胰島 β 細胞的形態(tài)相似。該細胞具有典型的 β 細胞功能,能夠合成、儲存并分泌胰島素。在葡萄糖刺激下,MIN-6 細胞可呈現(xiàn)濃度依賴性的胰島素分泌,當(dāng)培養(yǎng)液中葡萄糖濃度升高時,細胞內(nèi) ATP 生成增加,促使鉀離子通道關(guān)閉、鈣離子內(nèi)流,進而觸發(fā)胰島素囊泡的胞吐釋放。此外,MIN-6 細胞還表達多種 β 細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子,如 PDX-1(胰十二指腸同源盒蛋白 1)、Ngn3(神經(jīng)元素 3)等,這些轉(zhuǎn)錄因子對維持細胞的 β 細胞特性和胰島素分泌功能至關(guān)重要 。
培養(yǎng) MIN-6 小鼠 β 細胞需要精準控制條件。常用含 15% 胎牛血清的 DMEM 培養(yǎng)基,高濃度血清為細胞生長和胰島素分泌提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子;同時添加 1% 的青霉素 - 鏈霉素混合液,防止微生物污染。細胞需在 37℃、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中生長。當(dāng)細胞融合度達到 70% - 80% 時,需及時傳代,使用 0.25% 胰蛋白酶 - 0.53mM EDTA 消化液消化細胞,傳代時避免過度消化影響細胞活性。此外,為維持細胞良好的胰島素分泌功能,培養(yǎng)過程中需注意控制葡萄糖濃度,一般維持在 11.1mM 左右,過高或過低的葡萄糖濃度都可能影響細胞的功能和存活。
在科研應(yīng)用方面,MIN-6 細胞發(fā)揮著重要作用。在糖尿病發(fā)病機制研究中,科研人員通過對細胞進行基因操作、模擬氧化應(yīng)激或炎癥環(huán)境,能夠深入探究胰島 β 細胞功能衰退、凋亡的分子機制,以及胰島素抵抗發(fā)生的相關(guān)因素。在藥物研發(fā)領(lǐng)域,MIN-6 細胞可用于篩選具有促進胰島素分泌、保護胰島 β 細胞功能的新型藥物,評估藥物對細胞增殖、胰島素分泌和存活的影響,為臨床治療糖尿病提供有效的藥物選擇。此外,該細胞還可用于研究胰島 β 細胞與免疫細胞之間的相互作用,探索免疫治療在糖尿病防治中的應(yīng)用潛力。