ECV-304人臍靜脈內皮細胞

規(guī)格：70%密度的25cm2培養(yǎng)瓶的細胞一瓶

特點：細胞代數(shù)為2-3代

包裝：內層無菌自封袋；專用防壓泡沫盒；外層防壓保溫氣泡袋；說明書

細胞來源：ATCC、sciencell、DSMZ、ECACC、國內

貨期：1-2周

運輸方式：快遞運輸

 ECV-304人臍靜脈內皮細胞

售后服務：

復旦大學提供原代/傳代細胞，質量保證，生長狀態(tài)良好，沒有細菌 真菌 支原體等微生物污染。細胞一般以T25培養(yǎng)瓶包裝，容積75ml細胞數(shù)量可達10的6次方左右。購買方收到細胞應當馬上檢查，如發(fā)現(xiàn)細胞狀態(tài)不佳或者大部分死亡情況下，須當天聯(lián)系我司。得到我技術確認后免費補發(fā)一株。一周內發(fā)現(xiàn)細胞有污染情況，請拍照記錄并與銷售部聯(lián)系。

售后：收到細胞后7天，如發(fā)現(xiàn)細胞有質量問題（如污染，死亡，快遞運輸?shù)仍颍r，應出具書面質量問題報告并及時傳真或E-mail致銷售人員，我們將盡快為您解決。

備注：剛收到細胞時，胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天，利于細胞盡快恢復狀態(tài)，細胞狀態(tài)穩(wěn)定后，再調回10%即可。

細胞污染和補救方法：

一、菌污染

狀態(tài)：若細胞出現(xiàn)細菌污染，肉眼觀察培養(yǎng)基會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色變黃，渾濁，顯微鏡下觀察培養(yǎng)基，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基中有黑色細沙狀的物體，有規(guī)律的移動，對細胞的生長影響明顯，嚴重時會導致細胞裂解死亡。

<菌污染>

預防和補救：

1.保證細胞操作是處于完全無菌的狀態(tài)；

2.將培養(yǎng)箱徹底消毒滅菌，如使用84消毒液及75%酒精擦拭培養(yǎng)箱，另外需定期對培養(yǎng)箱進行消毒處理；

3.將感染細菌的細胞及時丟棄，防止污染其他細胞。

二、霉菌及真菌污染

       狀態(tài)：肉眼觀察培養(yǎng)基發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色基本無變化，不渾濁，但是培養(yǎng)基中由絮狀漂浮物，顯微鏡下觀察，若感染真菌可看到分叉細絲狀的結構（不同種類結構不同），若感染霉菌顯微鏡下可看到片狀的結構，不透明，真菌及霉菌對影響細胞的生長影響不大。

<真菌污染>

預防和補救：

     1.保證細胞房的干凈整潔，干燥的環(huán)境(潮濕的環(huán)境利于霉菌及真菌的生長)。

     2.控制外來人員進出實驗室。

     3.對實驗室及培養(yǎng)箱進行徹底消毒。

     4.若細胞非常珍貴，且不易獲得，可以對污染的細胞采取如下操作。

     懸浮細胞：收集SCL-1 Cell并離心，用PBS漂洗，重復此操作數(shù)次。

     貼壁細胞：用PBS輕輕沖洗細胞，丟棄，重復此操作數(shù)次。

三、支原體感染

      狀態(tài)：在普通光學顯微鏡下無法觀察到支原體，需使用光學顯微鏡或者電鏡進行觀察，細胞感染支原體后，生長極其緩慢，形態(tài)不佳，培養(yǎng)基無明顯變化。

預防和補救：

       預防：實驗室新購買的血清及培養(yǎng)基需檢測是否含有支原體，引進的新品種細胞需做支原體檢測，向培養(yǎng)基中添加預防支原體的抗生素。

       補救：向培養(yǎng)基中添加抗生素，（如氧氟沙星10 μg/ml、環(huán)丙沙星10 μg/ml、卡那霉素20~50 μg/ml、四環(huán)素10~50 μg/ml、慶大霉素200μg/ml等抗生素），或者向培養(yǎng)基中添加支原體清除劑清除支原體數(shù)天。

四、黑蛟蟲

       狀態(tài)：在普通光學顯微鏡下可觀察到培養(yǎng)基中有許多黑點，但當細胞密度大時，黑點會減少，培養(yǎng)基無明顯變化，一般不會影響細胞的生長。黑膠蟲來源于血清中。

<黑蛟蟲污染>

       預防和補救：一般黑膠蟲不會影響細胞的生長狀態(tài)，可以嘗試改變培養(yǎng)基的品牌。血清凍融采取逐級凍融的方法。

五、原蟲感染

      狀態(tài)：培養(yǎng)液可輕微渾濁，顯微鏡下那些細小的點狀物數(shù)量非常多，輕微活動，細胞雖然可用生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態(tài)不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生，但會與SCL-1 Cell爭奪營養(yǎng)。這種共生是非常普遍的，但他們的數(shù)量小，細胞占優(yōu)勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數(shù)量時就會影響到細胞的生長，zui終形成惡性循環(huán)。

<原蟲污染>

       影響細胞污染的因素很多，在我看來污染源主要是是細胞操作及細胞培養(yǎng)箱環(huán)境。這需要我們：

      1、提高細胞操作技巧，禁止交叉使用槍頭，在酒精燈火焰5公分距離內操作。

      2、定期對細胞培養(yǎng)箱消毒，培養(yǎng)箱水盤中的水也要定期更換，并使用無菌水。

      3、進入細胞房之前及在無菌操作臺操作SCL-1 Cell實驗之前需使用紫外燈照射30分鐘。

      4、每次開培養(yǎng)箱之前需用酒精消毒雙手。

      5、定期對培養(yǎng)箱進行消毒。

      6、配制的培養(yǎng)基需驗證無菌后方可進行細胞培養(yǎng)。